Cas pratique : récolte d’une culture de phytoplancton Tetraselmis
Préambule : Cet article a pour objectif de détailler les différentes étapes de récolte de phytoplancton dans une culture destinée à l’aquarium recifal
Outre la photosynthèse nécessaire au développement du phytoplancton, le phytoplancton marin cultivé dans des réacteurs a besoin de l’ajout d’une solution nutritive pour se développer. Cette solution appelée plus communément « engrais » doit contenir tout les éléments essentiels pour son développement ( sels nutritifs, vitamines etc.. )
Afin d’avoir un engrais « reefsafe » c’est à dire compatible pour l’aquarium recifal, il existe 2 solutions nutritives intéressantes : Le milieu de culture conway et la formule guillard F2P
Le milieu Conway
Le milieu de culture Conway est une solution enrichie en sels nutritifs réalisée grâce à la préparation de trois solutions :
La solution 1 (couramment appelée solution de Conway), composée de sels et de traces de métaux ;
- Acide Ethylènediamine sel disodique – Na2 EDT A
- Acide Borique – H3Bo3
- Nitrate de Sodium- NaN03
- Dihydrogénophosphate de Sodium – NaH2P04
- Chlorure de Manganèse – MnCl2 4H20
- Chlorure de Fer- FeCl3
- Solution métallique
- Eau distillée
La solution de métaux qui intervient dans la composition de la solution 1 :
- Chlorure de Zinc – ZnCI2
- Chlorure de Cobalt – CoCl2, H20
- Métarnolybdate d’Ammonium ( Nf4)6 Mo7024, 4H20
- Sulfate de Cuivre- CuS04, 5H20
- Eau distillée
La solution 2 qui est une solution vitaminée.
- Vitamine B1
- Vitamine B12
- Eau distillée
Source : Article Ifremer sur la technique de production d’algues unicellulaire
La formule Guillard F2P
La formule Guillard F2P est la concentration de la formulation originale, appelée “f Medium” (Guillard et Ryther 1962) réduite de moitié . Elle a l’avantage de mélanger tout les éléments essentiels et vitamines dans une seule solution :
Solution mère :
- Nitrate de sodium – NaNO3
- Phosphate de sodium – NaH2PO4 H2O
- Sodium carbonate anhydre EPR
Solution de traces de métaux :
- Chlorure de fer – FeCl3 6H2O
- molybdate de sodium – Na2MoO4 2H2O
- sulfate de zinc – ZnSO4 7H2O
- chlorure de cobalt – CoCl2 6H2O
- chlorure de manganèse – MnCl2 4H2O
Solution vitaminique :
- vitThiamine HCl (Vitamin B1)
- Cyanocobalamin (Vitamin B12)
- Biotin
Source : Catalogue Microalgae strain at The University of Manchester
Analyse récolte culture phytoplancton Tetraselmis
Détails de la culture :
Culture de phytoplancton réalisée avec éclairage 24h/24 en led horticole, avec ajout de l’engrais formule Guillard F2P tous les 4 jours. Quantité d’engrais ajouté : 1 ml pour 1 litre de culture.
Suivant la maturité de la culture ( test avec disque de Secchi sur une culture très dense ), nous avons stoppé l’ajout de l’engrais 7 jours avant la récolte.
Ensuite, 2h avant la récolte, nous avons arrêté le brassage du réacteur afin que le phytoplancton bien dense se dépose au fond du réacteur.
Enfin nous avons prélevé une partie de ce phytoplancton ( la partie bien dense ) et préparé pour analyse.
Analyse de la récolte
Une partie de la récolte est prélevée puis analysée au microscope afin de vérifier si elle n’a pas été contaminée par d’autres organismes vivants.
Nous conseillons d’utiliser un microscope inversé à contraste de phase pour étudier le phytoplancton. Les microscopes « classiques » ne sont pas assez précis et n’ont pas le grossissement nécessaire à l’étude du phytoplancton.
Ensuite une analyse en laboratoire est réalisée, sur le principe d’un ajout de 4 ml de phytoplancton pour 100 litres de bac.
Dans le cas de l’analyse, afin de rester dans l’environnement réel c’est à dire 4 ml de phytoplancton / 100 litres d’aquarium tous les 2 jours.
Nous avons préparé 25 litres d’eau osmosée et rajouté 1 ml de concentrée de phytoplancton.
L’analyse reçue démontre aucune trace de polluant versus l’analyse de l’engrais utilisé.
Analyse laboratoire engrais F2P rajouté ( 1 ml pour 1 litre de culture ).
Analyse laboratoire du phytoplancton récolté ( 7 jours après le dernier ajout d’engrais )
Analyse complète engrais guillard F2P utilisé dans la solution Phytoboost :
Analyse complète phytoplancton :
Test laboratoire 03.09.2021 échantillon phytoplancton Tetraselmis
Synthèse pour la mise en place d’une culture de phytoplancton
Cette analyse révèle l’importance de stopper l’ajout de l’engrais plusieurs jours avant la récolte. Stopper cet ajout 3-4 jours avant la récolte nous parait insuffisant. A l’inverse laisser la culture tourner sans engrais plus de 10-12 jours risquera d’entrainer un crash de la culture. Un juste milieu de 7 jours nous parait donc idéal.
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